西瓜(Citrullus lanatus)是世界十大水果之一。西瓜果實(shí)含糖量是衡量西瓜果實(shí)品質(zhì)的重要指標(biāo)。西瓜果實(shí)中的糖分主要是蔗糖,葡萄糖和果糖,而蔗糖含量決定了西瓜果實(shí)含糖量的高低。前期研究結(jié)果表明,invertase轉(zhuǎn)化酶可以促進(jìn)蔗糖的快速分解,是蔗糖代謝中的重要功能基因,但其被調(diào)控的分子機(jī)制并不十分清楚。
NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)轉(zhuǎn)錄因子在果實(shí)成熟和品質(zhì)中起重要作用。西瓜基因組編碼80個(gè)NAC基因,其中21個(gè)NAC基因在果肉和維管組織中高量表達(dá)。在這些基因中,ClNAC68在果肉中的表達(dá)顯著高于果皮。然而,ClNAC68在果實(shí)成熟和品質(zhì)方面的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制尚不清楚。在這項(xiàng)研究中,研究者發(fā)現(xiàn)ClNAC68是一個(gè)轉(zhuǎn)錄抑制子。CRISPR-Cas9系統(tǒng)敲除ClNAC68可降低突變體果肉中的可溶性固形物含量和蔗糖積累(圖1)。轉(zhuǎn)錄組分析發(fā)現(xiàn),在突變體果肉中,共有501個(gè)差異基因,主要聚類在糖代謝相關(guān)途徑。其中,只有蔗糖代謝途徑上的關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)化酶基因ClINV在突變體果肉中上調(diào)。EMSA和雙螢光素酶分析表明,ClNAC68直接與ClINV的啟動(dòng)子結(jié)合,并抑制其表達(dá)(圖2)。該研究首次闡明了ClNAC68通過抑制invertase酶活性,進(jìn)而提高果肉中糖的積累,進(jìn)一步豐富了NAC轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控西瓜西瓜果實(shí)糖代謝的分子機(jī)制。
王晉芳博士和王艷萍博士為該論文的共同第一作者,郭紹貴研究員及張海英研究員為該論文通訊作者。